摘要: 目的:构建小鼠H-2D~b-BSP融合基因,并诱导其在大肠杆菌中表达.方法:采用RT-PCR方法从C57BL/6小鼠淋巴细胞中扩增出H-2D~bα链的胞外段基因,经双酶切置换已构建的HLA-A*0201-BSP重组体中的HLA-A*0201胞外段序列,使H-2Db与BirA酶底物肽(BSP)序列融合,构建H-2D~b-BSP融合基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(λDE3)菌株,筛选重组子,并经IPTG诱导融合蛋白表达.结果:构建的H-2D~b-BSP融合基因插入正确且序列与GenBank一致;经1 mmol/L浓度的IPTG诱导后4b蛋白表达达到高峰,且融合蛋白以包涵体形式存在.结论:成功构建H-2~b-BSP融合基因,并诱导其在大肠杆菌得以表达,为进一步构建H-2D~b四聚体,研究T细胞应答提供了物质基础.